Le carcinome corticosurrénalien (CCS) est une tumeur rare et agressive du cortex surrénalien. La prise en charge thérapeutique repose principalement sur la chirurgie, seule approche à visée curative pour les formes localisées. En revanche, les options systémiques restent limitées dans les formes avancées, soulignant la nécessité d’identifier de nouveaux mécanismes moléculaires impliqués dans la tumorigenèse. Parmi les altérations oncogéniques majeures du CCS, l’activation aberrante de la voie Wnt/β-Caténine, notamment liée à la présence de mutations activatrices de la β-Caténine, constitue un évènement fréquent et associé à l’agressivité tumorale.

Parallèlement à la dérégulation de la voie Wnt/β-Caténine, des anomalies d'expression des microARN (miARN) ont été identifiées dans le CCS. Les miARN sont de petits ARN non-codants impliqués dans la régulation post-transcriptionnelle de l’expression génique. Ils jouent un rôle majeur dans la tumorigenèse en régulant l'expression de gènes impliqués dans la prolifération cellulaire, l’angiogenèse et les métastases. Au-delà de leur fonction au sein de la cellule d’origine, les miARN participent à la modulation du microenvironnement tumoral (MET) en étant encapsulés dans des vésicules extracellulaires (EV) puis sécrétés dans le milieu environnant. Notre équipe a précédemment démontré que l’activation aberrante de la voie Wnt/β-Caténine dans le CCS induit la surexpression de miARN associés au mauvais pronostic. Une sous-population de ces miARN a été détectée dans les petites EV (sEV), communément appelées « exosomes », dérivées de cellules de CCS.

L’objectif de cette thèse était d’étudier l’impact de l’activation constitutive de la voie Wnt/β-Caténine sur la sécrétion, le contenu moléculaire et la fonction des sEV dans le CCS. Pour cela, nous avons utilisé la lignée cellulaire H295R exprimant un shRNA inductible ciblant la β-Caténine mutée.

Mes travaux démontrent que la répression de la β-Caténine mutée stimule la sécrétion des sEV par les cellules du CCS, un effet qui s’accompagne d’une induction de l’expression des principaux acteurs de leur biogenèse (Alix, CD9, CD63, nSMase2) et de leur libération (Rab27A). Cette sécrétion accrue est concomitante d’une déplétion significative des sEV en protéines et miARN pro-tumorigéniques qui pourraient avoir un fort potentiel de remodelage du MET lorsque la voie est constitutivement active. En effet, nous montrons que les sEV isolées à partir de cellules H295R n’exprimant pas la β-Caténine (β-Cat⁻) inhibent significativement la prolifération des cellules endothéliales microvasculaires de la glande surrénale humaine (HAdMEC), qui constituent une composante importante du microenvironnement. En revanche, les sEV β-Cat⁻ stimulent la migration des HAdMEC, mais dans une moindre mesure que celles dérivées de cellules (β-Cat+). L’impact des sEV sur le potentiel métastatique des H295R a ensuite été évalué dans un modèle in vivo de membrane chorioallantoïdienne de poulet (CAM). Le traitement de xénogreffes de cellules H295R β-Cat⁻ implantées sur la CAM supérieure par des sEV β-Cat⁺ a significativement augmenté la dissémination tumorale à la CAM inférieure. Afin de valider la pertinence clinique de ces observations expérimentales, l’expression des marqueurs associés à la biogenèse des sEV a été analysée dans trois cohortes indépendantes de patients porteurs de CCS. Ces analyses transcriptomiques ont mis en évidence une diminution significative de l’expression de plusieurs marqueurs des sEVs dans les tumeurs présentant une activation constitutive de la voie Wnt/β-Caténine, en accord avec nos observations in vitro obtenues dans les modèles cellulaires.

Dans l’ensemble, cette thèse révèle un nouveau rôle de la signalisation Wnt/β-Caténine dans le CCS. Mes travaux montrent pour la première fois que cette voie contrôle la biogenèse, la sécrétion et le contenu moléculaire des sEV, leur conférant des propriétés favorisant le remodelage du MET et la dissémination métastatique. L’identification d’un profil transcriptomique associé aux sEV chez les patients porteurs du CCS ouvrent de nouvelles perspectives pour l’utilisation des sEV comme biomarqueurs et comme cibles/outils thérapeutiques potentiels dans le CCS .

Direction / Supervision​
Nadia Cherradi