Microscopie de surface corrélative pour l’analyse d’échantillons biologiques
Référence | 3386327 |
Domaine scientifique | Sciences du vivant |
Spécialité | Biotechnologie |
Moyens | |
Compétences Informatiques | |
Mots clés | caractérisation spectroscopique (TOF-SIMS, photoémission) et AFM et |
Durée du stage | 6 mois |
Lieu | Grenoble |
Localisation | Région Rhône-Alpes (38) |
Formation | Ingénieur/Master |
Niveau d'étude | Bac + 4/5 |
Thèse possible | 1 |
Date de diffusion | |
Description du stage | "Contexte : Dans les domaines de la biologie et de la santé dans lesquels le LETI est actif, la combinaison de plusieurs techniques de caractérisation dans une approche multi-modale, multi-échelle est essentielle pour analyser et comprendre les systèmes biologiques en question et les processus impliqués dans leur traitement. Notre approche consiste à combiner trois techniques complémentaires de nanocaractérisation physique, déjà éprouvées dans le domaine de la nanotechnologie, pour l'analyse d'un même échantillon biologique sur une zone d'intérêt identique (co-localisation). Ces techniques sont la microscopie à force atomique (AFM), la spectrométrie de masse à temps de vol (TOF-SIMS) et les techniques de photoémission par rayons X (XPS, PEEM). Un de leurs avantages majeurs est de ne pas avoir recours à un marquage chimique de l'échantillon, étape qui peut induire des artefacts. L'AFM permet d'obtenir une imagerie topographique de la surface, permettant par exemple d'observer les protrusions (microvilli) présentes à la surface d'une membrane cellulaire. Le TOF-SIMS permet d'accéder à une information moléculaire à l'échelle submicronique (par exemple, des variations de signature lipidique). La microscopie à photoémission d'électrons (PEEM) peut potentiellement permettre d'établir des cartographies d'énergie de 1ère ionisation (grandeur bio-spécifique) corrélées à l'XPS pour les états chimiques. Ces trois techniques à l'état de l'art sont regroupées dans le même laboratoire de la plateforme de nano-caractérisation (PFNC) du CEA-Grenoble et sont connectées par divers moyens de transfert d'échantillon pour l'analyse corrélative. Travail demandé : L'objectif du stage est de développer les protocoles de transferts d'échantillon, de microscopie corrélative et de profilage chimique avancé pour l'analyse combinée d'un même échantillon biologique par TOF-SIMS, AFM et photoémission. Le profilage avancé par faisceau d'ions poly-atomiques sera utilisée à la fois pour ôter la contamination de surface et pour effectuer des profils en profondeur. Le travail de stage se fera en étroite collaboration avec CLINATEC qui fournira des échantillons « modèles » pour le développement des protocoles. La corrélation des données d'analyse des trois techniques sera abordée. Le but final de ce stage est de montrer qu'une analyse fiable le même échantillon est possible par les trois techniques. Une poursuite en thèse est envisageable. " |
Email tuteur | barnesjp@cea.fr |